近年來，qPCR檢測技術(shù)，以及環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增（Loop-Mediated Isothermal Amplification，LAMP）技術(shù)，作為一種新興的核酸擴(kuò)增方法，在支原體臨床檢測中顯示出了巨大的潛力。

LAMP技術(shù)作為一種等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)，與傳統(tǒng)的PCR方法相比，不需要復(fù)雜的溫度循環(huán)，只需要穩(wěn)定的恒溫環(huán)境即可實(shí)現(xiàn)核酸擴(kuò)增。這使得LAMP技術(shù)在臨床實(shí)驗(yàn)室和野外條件下都具備廣泛應(yīng)用的可能性。LAMP技術(shù)（環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增）在支原體檢測中具有一些優(yōu)點(diǎn)和缺點(diǎn)，下面分別進(jìn)行詳細(xì)介紹：

優(yōu)點(diǎn)：

快速擴(kuò)增： LAMP技術(shù)采用等溫條件，不需要復(fù)雜的溫度循環(huán)，因此擴(kuò)增速度較快，通?？梢栽?span>30分鐘到1小時內(nèi)完成，比傳統(tǒng)PCR更迅速。

高特異性： LAMP技術(shù)在引物設(shè)計(jì)上采用多個特異性引物，結(jié)合復(fù)雜的擴(kuò)增動力學(xué)，提供了較高的特異性，能夠準(zhǔn)確地區(qū)分目標(biāo)支原體序列。

設(shè)備簡單： LAMP反應(yīng)只需要一個穩(wěn)定的恒溫環(huán)境，例如恒溫水浴或熱擬溫器，不需要復(fù)雜的溫度控制設(shè)備，降低了實(shí)驗(yàn)的技術(shù)和設(shè)備門檻。

結(jié)果可視化： LAMP擴(kuò)增產(chǎn)物通常形成可肉眼觀察的渾濁沉淀物，有助于直接觀察擴(kuò)增結(jié)果。此外，可以通過添加熒光染料或指示劑，實(shí)現(xiàn)產(chǎn)物的熒光可視化，進(jìn)一步提高結(jié)果分析的便捷性。

適用于野外應(yīng)用： LAMP技術(shù)在野外環(huán)境中也能夠?qū)嵤?，因?yàn)樗恍枰粋€恒溫環(huán)境，適用于一些需要快速診斷的場景，如偏遠(yuǎn)地區(qū)或?yàn)?zāi)害現(xiàn)場。

缺點(diǎn)：

復(fù)雜的引物設(shè)計(jì)： LAMP技術(shù)需要設(shè)計(jì)多個引物，包括外部引物、內(nèi)部引物和環(huán)引物，引物設(shè)計(jì)較為復(fù)雜，需要耗費(fèi)一定的時間和資源。

產(chǎn)物結(jié)構(gòu)復(fù)雜： LAMP擴(kuò)增產(chǎn)物呈現(xiàn)出高度分支的簇環(huán)結(jié)構(gòu)，這種結(jié)構(gòu)可能對產(chǎn)物的純化和后續(xù)分析造成一些挑戰(zhàn)。

不適用于大片段擴(kuò)增： LAMP技術(shù)相對適用于短片段的核酸擴(kuò)增，不太適用于較長片段的擴(kuò)增，這一點(diǎn)與傳統(tǒng)PCR方法不同。

定量困難： LAMP技術(shù)的產(chǎn)物數(shù)量與起始模板數(shù)量之間的線性關(guān)系可能較差，因此在定量方面存在一定的局限性。

部分產(chǎn)物難以區(qū)分： LAMP反應(yīng)產(chǎn)物包括多個簇環(huán)結(jié)構(gòu)，其中有些結(jié)構(gòu)可能與非特異性產(chǎn)物難以區(qū)分，可能對結(jié)果解釋帶來困擾。

綜上所述，LAMP技術(shù)在支原體檢測中具有快速、高特異性、設(shè)備要求簡單等優(yōu)點(diǎn)，但也存在引物設(shè)計(jì)復(fù)雜、產(chǎn)物結(jié)構(gòu)復(fù)雜以及部分定量困難等缺點(diǎn)。選擇是否采用LAMP技術(shù)還需綜合考慮具體實(shí)驗(yàn)需求和條件，以及在實(shí)際應(yīng)用中的可行性。

因此，綜合考慮，qPCR技術(shù)在支原體檢測的生物醫(yī)藥領(lǐng)域的工業(yè)檢測中，目前還是難以被取代的。